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為什么細胞培養用牛血清，而不用其他動物血清

牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能.1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物.2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力.3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用.4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源.5.起酸堿度緩沖液作用.6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩...

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細胞生長緩慢的原因

一.個別人的培養體系出現問題1.檢查你所培養的細胞是否存在污染。(a)如果培養細胞未添加抗生素(必須添加!),細胞污染則是不可避免的。1)用肉眼和顯微鏡進行檢查2)如果細胞被污染則要棄掉。(b)由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測(c)檢測可能污染的途徑和原因2.檢查你用于培養細胞的培養基和血清(例如:是否批次不同或廠商不同)。如果你常規使用的是粉劑或10X儲存液，而現在購買的培養基更換為1X液體，而隨后證明問題就出自于此，處理方法請參見下則分享內容。3.如果問題與培...

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原代細胞培養那些事兒

原代細胞培養之分離注意事項1、組織塊培養法1）組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2）加入的培養液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3）當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產生的有毒物質會影響原代細胞的生長。4）為促進組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。2、貼壁型原代細胞1)原代培養的分離細胞在初...

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細胞培養那點事兒.....

細胞培養做為生物學研究最基礎的技術之一，可以說是滲透科研界的方方面面。工欲善其事，必先利其器。細胞好不好，就看你懂不懂細胞培養的各種技術了。?原代培養從原代組織中分離細胞的常用的方法是酶解法（胰蛋白酶和膠原酶）。用無菌的解剖刀和剪子將組織剪成3~4mm小片，用平衡液（無鈣鎂離子）清洗組織碎片后去除上清液，并加入0.25%的胰蛋白酶（Trypsin，100mg組織加入1ml胰蛋白酶）或者膠原酶（Collagenase，50~200單位/ml），孵育4-18h。離心取上清后，用平...

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細胞培養問題----沉淀

細胞培養問題----沉淀當排除了污染后，細胞培養基的渾濁通?？梢越忉尀榻饘?、蛋白質和其他培養基成分的沉淀。沉淀物可能對細胞健康有害，因為他們可能通過整合作用等過程去除營養物質和其他需要的成分，從而改變培養基成分。沉淀的原因溫度變化溫度是細胞培養中沉淀的主要原因之一。當暴露于端溫度變化時，高分子量的血漿蛋白會從溶液中沉降。熱失活和凍融循環會促進蛋白質的變性和沉淀。由于液體或復溶培養基在每次使用之間保持冷藏狀態，鹽可能會沉淀出來，特別是10倍或其他濃縮液中析出。失水引起的濃度變化...

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細胞培養及操作步驟

一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后，經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群，使之在體外模擬人體生理環境，在無菌、適當溫度和一定的營養條件下，生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分，生長緩慢，但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養做各種實驗，如藥物測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。其操作步驟如下。1.剪切組織先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附...

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27個細胞傳代培養常見問題

1、一般拿到細胞后，應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各兩張)，排除細胞本身污染的情況。2、何時須更換培養基?視細胞生長密度而定，常規細胞2-3天更換培養基。3、細胞何時進行傳代較好?一般情況下細胞生長至*匯合后就應該傳代，所有細胞生長都有一個要求不宜...

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細胞生長不良常見原因及解決方案

細胞生長不良常見原因及解決方案儲存物解凍后無活細胞或活細胞少原因解決方案儲存培養物質量不佳確保正確識別了用于儲存的起始培養物，該培養物是健康的，無微生物污染的，并且處于生長的對數階段后期（80-90%匯合度）儲存物冷凍不當在液氮中冷凍細胞時2，請確保細胞、培養基和其他實際的濃度以及冷凍方案遵循供應商的建議。通常，應以每分鐘約1至3℃的速度緩慢凍結，以大程度地減少冰晶的形成。為細胞選擇最合適的冷凍保護劑。如果使用甘油，請勿將其儲存在光線下，因為光照會使甘油轉化為具有細胞毒性的烯...

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