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蘇州千舍生物 ELISA試劑盒樣本處理方法

樣品前處理：a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。c)對(duì)于組織樣品：把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每20...

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蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些細(xì)節(jié)

蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些細(xì)節(jié)養(yǎng)細(xì)胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細(xì)對(duì)待，愛護(hù)她，呵護(hù)她。如果你照顧的時(shí)候能注意這些問題，會(huì)讓你的細(xì)胞養(yǎng)的更好。下面就將養(yǎng)細(xì)胞的注意事項(xiàng)跟大家交流一下。一、細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備在您帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺(tái)，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。結(jié)...

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蘇州千舍生物教你如何挽救細(xì)胞污染

蘇州千舍生物教你如何挽救細(xì)胞污染以自建細(xì)胞系(laryngealsquamouscarcinoma-1，LSC-1)第12代的某一被細(xì)菌污染的細(xì)胞株采取救治，比較效果并分析細(xì)胞生物學(xué)特性。一、實(shí)驗(yàn)方法1、抗生素法：細(xì)菌培養(yǎng)：用無抗生素*培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞3d，收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養(yǎng)基，35e培養(yǎng)。所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素，抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據(jù)細(xì)菌藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果選出敏感抗生素，每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個(gè)...

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蘇州千舍生物教你如何解決“細(xì)胞空泡化”

蘇州千舍生物教你如何解決“細(xì)胞空泡化”“細(xì)胞空泡化”在細(xì)胞培養(yǎng)中也是一個(gè)常見問題，它的出現(xiàn)原因有多種，實(shí)驗(yàn)人員碰到往往會(huì)很頭疼。在文章中小給列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因，方便大家進(jìn)行分析選擇解決的方法。一、可以引起細(xì)胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些？1.細(xì)胞老化原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài)，不會(huì)再分裂，時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)空泡化而死亡。傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，出現(xiàn)的原因一般都是因?yàn)榧?xì)胞傳代次數(shù)過多，老化嚴(yán)重。2.PH值培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需...

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蘇州千舍生物教你如何選擇培養(yǎng)基和血清

蘇州千舍生物教你如何選擇培養(yǎng)基和血清細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里常規(guī)和基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)了，但卻不是簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，GIBCO、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。◆MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基...

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蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意事項(xiàng)

蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)在生命科研的地位舉足輕重。實(shí)驗(yàn)君的很多成果可謂是成也細(xì)胞培養(yǎng)，敗也細(xì)胞培養(yǎng)。然而細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀！科研人是不會(huì)這么被輕易打敗的。1.新買的細(xì)胞如何處理？細(xì)胞剛拿到手應(yīng)趕緊做這幾件事：檢測(cè)瓶子是否破裂；培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴(kuò)增凍存。2.能否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無...

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蘇州千舍生物教你如何培養(yǎng)細(xì)胞之細(xì)胞消化

蘇州千舍生物教你如何培養(yǎng)細(xì)胞之細(xì)胞消化細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就細(xì)胞消化而言，多做、善于總結(jié)，就可以把細(xì)胞養(yǎng)的越來越好。絕大部分細(xì)胞消化只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可：吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞（絕大部分1min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后37度消化。怎樣算是消化好了呢？不需要把細(xì)胞全部消化成間隔分布很離散的單個(gè)圓形...

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蘇州千舍生物教你如何更好的培養(yǎng)細(xì)胞

蘇州千舍生物教你如何更好的培養(yǎng)細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，這些問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞不貼壁、生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因：●胰蛋白酶消化過度；●支原體污染；●培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）；●細(xì)胞老化；●接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度；●分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物；●使用無菌醋酸溶液...

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