熱滅活胎牛血清（WinSera）

產品名稱：熱滅活胎牛血清

英文名稱：Heat-inactivated fetal bovine serum

規格：500ml

品牌：WinSera ®（千舍出品）

品牌：WINSERA®國內科研實驗室使用比較普遍，價格相對實惠，能滿足很多常規細胞的培養需求。

相對而言，國產品牌血清由于采血的不可控性和生產工藝的差別，質量參差不齊，最讓人擔心的還是批間差異大，質量不穩定。

它來了 它來了  2022它風風火火的走來了~~

童鞋甲：常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時間則從15分鐘到60分鐘不等，其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養的細胞是什么，一般的話估計問題不大，要是很珍貴的細胞還是慎重一點啊。

童鞋乙：熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質， 在對補體滅活以外，熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。現在好像不主張熱滅活，熱滅活經常給血清產品帶來負面影響，對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生，此外，有研究結果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用。

專家A：實驗顯示，即使對血清進行正確的熱滅活處理,對大多數的細胞而言也是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進，或*沒有任何作用，甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低。

而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是"小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增。

因此若非必須,可以不需要做熱處理這一步.如此一來,不但節省寶貴的時間,更確保血清的質量。

專家B：血清從-20℃冰箱拿出來之后在常溫解凍，然后混勻分裝成兩份，一份滅活，一份不滅活，比較這兩種血清對細胞是否有影響。然后再確定是滅活還是不滅活。這個過程最多也就一個星期。同時你還要考慮血清滅活與否對你后續的實驗有沒有影響。

一般來說，像巨噬細胞或者能被補體激活的而影響實驗過程或者結果的細胞，血清在使用前必須滅火，還有就是原代細胞，這類細胞必須使用滅活血清；但是像其他細胞株，沒必要的。因為滅火過程中不僅會滅火補體，還能損傷血清中的其他物質，不利于細胞生長。

最后是老營長的總結

（科學面對血清熱滅活的爭議）

成為常規操作的血清熱滅活

至少70%的研究者對血清的滅活僅僅是因為遵照常規操作，或者說認為是理所當然的。常規滅活建議的溫度在45℃到62℃之間，而時間則從15分鐘到60分鐘不等，其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高，許多早先認為是熱滅活的原因已經不再成立，只有少數對血清進行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。

熱敏補體與熱滅活

熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質，但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。Triglia和Linscott曾對商業胎牛血清中的補體成分進行測定，他們發現胎牛血清中含有的C1，C6僅達成年動物血清的1-3%，而其它補體成分僅有成年動物的5-50%，至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗，我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結果。即使是在未稀釋的血清中，也未發現有明顯的溶血現象。

另外，多數實驗室在培養前將培養液進行預熱的過程，也對熱敏的補體有滅活的作用。

支原體與熱滅活

在對補體滅活以外，熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。多年以前，450納米孔徑的濾膜被用于加工血清時，血清中支原體的污染時有發生。針對這個問題，HyClone使用100納米三層濾膜連續濾過技術，自從采用這項技術以及后來的40納米濾過技術之后，我們的血清產品中沒有再發現有支原體的污染，也是使得熱滅活成為不必要的另外一個原因。

人誘導多能干細胞（iPSC）培養體系

iPS細胞培養添加劑（配套）

iPS細胞消化液（相關1）

matrix基質膠（相關2）

iPS細胞專用因子Y27632（相關3）

H9人類胚胎干細胞培養體系

H9細胞培養添加劑（配套）

H9細胞消化液（相關1）

matrix基質膠（相關2）

H9細胞專用因子Y27632（相關3）

H1人類胚胎干細胞培養體系

H1細胞培養添加劑（配套）

H1細胞消化液（相關1）

matrix基質膠（相關2）

H1細胞專用因子Y27632（相關3）

干細胞成骨誘導分化試劑盒（培養體系）

干細胞成軟骨誘導分化試劑盒（培養體系）

干細胞成脂誘導分化試劑盒（培養體系）

原代上皮細胞培養體系

原代內皮細胞培養體系

原代成纖維細胞培養體系

原代成纖維細胞無血清培養基

原代平滑肌細胞低血清培養體系

原代平滑肌細胞培養體系

原代神經元細胞培養體系

原代少突膠質細胞培養體系

原代星形膠質細胞培養體系

原代肝實質細胞培養體系

原代星狀細胞培養體系

原代角質形成細胞培養體系

原代巨噬細胞培養體系

原代間充干細胞無血清培養體系

原代間充干細胞培養體系

原代內皮祖細胞培養體系

原代神經干細胞培養體系

原代周細胞培養體系

原代雪旺細胞培養體系

原代黑色素細胞培養體系

原代骨骼肌細胞培養體系

原代成骨細胞培養體系

原代軟骨細胞培養體系

原代腎系膜細胞培養體系

原代心肌細胞培養體系

原代前脂肪細胞培養體系

原代腫瘤細胞培養體系

原代間質細胞培養體系

原代T淋巴細胞培養體系

原代基質細胞培養體系

原代卵巢顆粒細胞培養體系

原代肥大細胞培養體系

原代樹突狀（DC)細胞培養體系

原代破骨細胞培養體系

原代NK細胞培養體系

原代精原細胞培養體系

熱滅活胎牛血清（WinSera）

原代內膜細胞培養體系

原代B淋巴細胞培養體系

原代CIK細胞培養體系

胚胎發育與熱滅活

Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發育分化；有研究結果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用，在用SV-BHK、BALB-3T3、CV－1、FS-4細胞對細胞粘附實驗中，熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響。

細胞株生長與熱滅活

我們調查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細胞株生長能力的影響。通過比較11個不同細胞株，發現其中熱滅活對6個細胞株（HBAE，MDBK，Vero，成纖維細胞，MRC-5）的生長帶來負面影響，三個細胞株（FOX-NY，MDCK和CHO-K1）不受熱滅活的影響，而只有兩個細胞株（Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid），在熱滅活之后，細胞生長有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。

沉淀與熱滅活

在正常操作下，熱滅活經常給血清產品帶來負面的影響，對血清的加熱經常導致血清中沉淀的產生，而導致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現象之后，為了驗證污染的存在，或者促進沉淀的溶解，許多培養者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟，血清中的蛋白進一步的析出，為了確信血清未被污染，進行的鏡檢，無菌培養試驗，和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力。

結論

總之，多數細胞培養中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下，熱滅活并不會改善細胞的生長，卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數有促進的情況下，其促進的比率也是微不足道的。另外，血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染，從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩。我們建議，對于那些對血清進行滅活的用戶，需要通過試驗來證實其必要性，確定滅活的適當條件；在滅活過程中，需要嚴格認真監測，并選擇一個可重復的方案進行操作。