產品名稱：小鼠胚胎細胞NIH/3T3

貨號：QS-M002

細胞規格：1-3×10^6細胞量

庫存狀態：現貨

培養液：DMEM(H)+10%NCS

凍存條件：80%*培養液+10%FBS+10%DMSO

運輸方式：常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期：復蘇細胞需要1-2周，凍存細胞的需要3-5天（特殊情況會有說明）

質 控：無支原體、無污染、符合標準

研究范圍：僅供科研使用

我司是一家專注于生命科學技術領域的高科技企業，在廣大用戶的幫助和支持下，經過不懈的努力，已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一，一站式采購商城，代理亞洲、歐美國家300多種品牌，200萬種以上產品。公司的服務和業務網絡遍及全國，在同行獲得*。

小鼠胚胎細胞NIH/3T3

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細胞培養基既是培養細胞中供給細胞營養和促使細胞生殖增殖的基礎物質，由于不同細胞來源不同的組織器官環境，其體外培養所需的養分不盡相同，選擇合適的培養基對細胞的培養至關重要。

按培養基的來源可分為合成培養基和天然培養基（目前使用的培養基絕大部分是合成培養基）。按其物質狀態可分為干粉培養基和液體培養基兩類，干粉培養基需由實驗者自己配制并滅菌（可靈活配制配比），液體培養基由專業商家提供（用戶可直接使用，非常方便）。

合成培養基成分

主要成分有：氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質。

氨基酸：是組成蛋白質的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細胞自身不能合成，必須依靠培養液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。因此，各種培養液中都有較大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定，應置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養液內。已含谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2 周以上時，還應重新加入原來量的谷氨酰胺。

維生素：在細胞培養中，盡管血清是維生素重要來源，但是許多培養基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。

碳水化合物：是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。

無機鹽：培養液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調節細胞膜功能。培養液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg～320 mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意：向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES 時需按以下“緩沖系統”方法調節鈉離子濃度。

緩沖系統：大多數細胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是，細胞培養zui適pH 值隨培養的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH (7.4 - 7.7), 而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多數培養液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2 體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2 濃度應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中CO2 濃度設定在5％，培養液中NaHCO3 的加入量為1.97g/L；如果CO2 濃度維持在10％，培養液中NaHCO3 的加入量為3.95g/L。同時，細胞培養瓶蓋不應擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES 緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES 引起的滲透壓增加。在這種培養條件下，細胞培養瓶的蓋子應擰緊，以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數培養液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養液呈橙黃色，堿性培養液呈深紅色。

其它成分：

在一些較為復雜的培養液中還包括其它一些成分，如：

（1）非必需氨基酸：有些細胞需要額外添加。

（2）丙酮酸鈉：是糖酵解的中間產物，可直接進出細胞，作為替代碳源添加。

（3）胰島素：可以促進細胞增殖。

（4）qing化可的松：可促進表皮細胞生長。

（5）IL-2：促進淋巴細胞生長，NK92依賴等。

（6）地塞米松：激素類，促進部分細胞生長。

（7）腎上腺素：促進部分細胞生長。

（8）轉鐵蛋白：為細胞內化和細胞代謝提供所需的鐵。

（9）2-qiu基乙chun（2-Mercaptoethanol，2-Me）：2-Me的活性部分是硫氫基，其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽，能誘導細胞的增殖，為非特異性的激活作用。另一個重要作用是促進分裂原的反應和DNA 合成，增加植物凝集素(PHA)對淋巴細胞的轉化作用。

液體培養基保存

液體培養基應于4℃冰箱避光保存，實驗前放入37℃預熱。未加血清液體培養基有效期為12個月。液體培養基中的L-谷氨酰胺會隨著儲存時間的延長而慢慢分解。如果細胞生長不良，可以再添加適量L-谷氨酰胺。

干粉培養基保存

4℃冰箱避光保存，有效期36個月。

血清

細胞培養液中添加的血清有牛血清、馬血清、人血清等，其中牛血清是zui常用的血清，分為胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是從母牛破腹取出的胎牛中分離出的血清，價格昂貴。新生牛血清是從剛出生的尚未哺乳的小牛中分離出來的血清，如廠家能做到這一點，新生小牛血清的質量與胎牛血清的質量相差不大。小牛血清，如小牛出生后已哺乳，從這種小牛中取出的血清中可能含有較多的生物活性物質，其質量明顯不如前兩種。

血清的質量，種類及使用的濃度都有可能影響細胞的生長，而不同批次的血清支持細胞生長的能力也不同，尤其是對克隆細胞的生長，某些批次血清可能含有毒性或抑制細胞生長的物質。因此，在購買大量血清之前，必須對血清支持細胞生長能力進行檢測，然后再大量購買質量好的同一批號的血清，并注意以下幾點：

（1）需要長期保存的血清必須儲存于-20℃–-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10％，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預留一定體積空間，否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。

（2）一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物，則可將血清加入培養液內一起過濾，切勿直接過濾血清。

（3）瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），使溫度與成分均一，減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃ 進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。

（4）熱滅活是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有：細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化。

（5）切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量。

（6）血清中的沉淀物絮狀物：主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質量。可用離心3000rpm, 5 分鐘去除，也可不用處理。

（7）顯微鏡下“小黑點”：經過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象“小黑點”，常誤認為血清受污染。一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質量，則應立即停止使用，更換另一批號的血清。