Cegrogen胎牛血清A0500-3011（低內毒素）使用說明

1.初次開封胎牛血清如何化凍？

胎牛血清常規(guī)儲存溫度為-20℃，如果更加長期保存可以-80℃保存。解凍的時候不建議直接放在常溫中（25-37℃）解凍，很容易產(chǎn)生絮狀沉淀，進而有可能影響血清品質。建議的方式為先由-20/-80℃轉移到4℃解凍，全部為液體后，再由4℃轉移到室溫。在解凍的過程中，需要隨時晃動，使血清內成分和溫度混合均勻，有助于減少沉淀的產(chǎn)生。解凍后，就可以把血清用15 mL或者50 mL無菌離心管分裝凍存啦，可以根據(jù)自己使用血清的頻率在4℃存放一管已化凍分裝的血清，方便經(jīng)常配制培養(yǎng)基，在4℃也不可以存放太久，最好在一個月內用完。解凍后的胎牛血清不可以在37℃或者室溫存放太久，避免血清中重要的細胞生長因子失活而影響細胞狀態(tài)。

2.血清的用量

原則上血清添加量不宜太多，通常添加5%、10%、20%。大部分細胞正常培養(yǎng)使用10%的血清濃度，部分細胞原代提取時使用20%血清。具體某一株細胞適應的血清濃度，需要根據(jù)細胞特性、實驗目的摸索。

3.胎牛血清什么時候需要熱滅活？

這就涉及到什么是熱滅活。熱滅活一般是以56℃，30 min來處理已解凍的血清，因為此加熱步驟，可以使補體去活化，而補體所參與的反應有：溶細胞活性，平滑肌的收縮，肥大細胞和血小板組胺的釋放，增強吞噬作用，淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。除了這些特殊實驗要求，常規(guī)細胞培養(yǎng)需要熱滅活嗎？通常來說，熱滅活對大多數(shù)細胞培養(yǎng)都不是必須進行的步驟，經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長作用很小，甚至可能會因為高溫處理影響了血清的質量，而造成細胞生長速率的降低，沉淀物增多等不好的影響。

4.更換血清的正確步驟。

養(yǎng)細胞的小伙伴經(jīng)常會遇到同一個細胞需要更換血清的情況。如果將另一款血清配制的培養(yǎng)基直接用于細胞培養(yǎng)，可能會發(fā)現(xiàn)以前增殖很快的細胞突然變慢甚至逐漸脫壁死亡了。這種情況下，多數(shù)為細胞被以往的培養(yǎng)環(huán)境馴化，突然更換一個新的營養(yǎng)環(huán)境，哪怕是品質更好的血清，也可能會出現(xiàn)不適應的情況。通常來說，更換血清的時候我們會遵循梯度更換保證細胞可以適應。血清開始使用時，如果是重新復蘇細胞，建議用原培養(yǎng)體系進行細胞復蘇，待細胞狀態(tài)恢復后再進行測試。測試時不建議直接100%換成新血清體系進行培養(yǎng)，應按照比例梯度替換。例如，先換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后替換。針對一些對培養(yǎng)體系較為敏感的細胞，需進一步細化替換比例。

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胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）和小牛血清（Calf Serum, CS）是兩種常見的生物試劑，廣泛應用于細胞培養(yǎng)和生物學研究。它們的主要區(qū)別在于哪些呢？

1、來源

胎牛血清（FBS）：來源于懷孕母牛的胎兒血液。胎牛血清通常是在牛胎兒被取出后，通過心臟穿刺方式收集血液，然后分離血清。

小牛血清（CS）：來源于出生后小牛的血液。通常收集3個月以下的小牛血液，再經(jīng)過離心分離血清。

2、成分

胎牛血清（FBS）：含有較高濃度的生長因子、激素和低水平的免疫球蛋白。這些成分對細胞培養(yǎng)非常有利，特別是對敏感細胞系的培養(yǎng)。

小牛血清（CS）：含有相對較高的免疫球蛋白和低水平的生長因子。由于小牛已經(jīng)暴露于外界環(huán)境，其血清中的免疫球蛋白水平較高，可能會影響某些實驗結果。

3、使用領域

胎牛血清（FBS）：

廣泛用于各種細胞培養(yǎng)，包括哺乳動物細胞系、干細胞和初級細胞培養(yǎng)。由于其成分比較均勻和豐富的生長因子，它被認為是優(yōu)質的血清類型。

小牛血清（CS）：多用于培養(yǎng)耐受性較高的細胞系或在不需要高水平生長因子的實驗中使用。也可以用于較低成本的應用或實驗中。

4、價格

胎牛血清（FBS）：

由于其高質量和廣泛的應用，FBS通常比小牛血清貴得多。

小牛血清（CS）：價格相對較低，適用于預算有限的研究項目。

5、優(yōu)缺點

胎牛血清（FBS）：

優(yōu)點：成分均勻，生長因子和激素含量高，適用于大多數(shù)細胞系。

缺點：價格昂貴，有倫理爭議。

小牛血清（CS）：

優(yōu)點：價格較低，可用于耐受性細胞系的培養(yǎng)。

缺點：免疫球蛋白含量較高，可能影響某些實驗結果。

6、總結

胎牛血清和小牛血清在成分、來源和應用上有顯著不同。胎牛血清更適合需要高質量培養(yǎng)條件的實驗，而小牛血清則適用于較為耐受的細胞系和成本敏感的實驗。選擇哪種血清需要根據(jù)具體的實驗需求、預算和細胞類型來決定。